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Clover®酶聯(lián)免疫試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)的必要性，通過預(yù)實(shí)驗(yàn)可以熟悉整個(gè)實(shí)驗(yàn)的流程，發(fā)現(xiàn)可能忽略的問題；可以測(cè)試樣本和試劑盒是否匹配，一旦出現(xiàn)不匹配的情況，不至于浪費(fèi)過多樣本；可以對(duì)樣品中目的分析物的濃度作一下大致參考，以確定合適稀釋度。

　　一、Clover®酶聯(lián)免疫試劑盒使用注意事項(xiàng)：

1. 室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫（20- 25℃）會(huì)導(dǎo)致數(shù)值偏低。

2. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥過久的情況，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板排干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

3. 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和顯色液對(duì)光敏感，避免直接暴露在光線下。

4. 混合要均勻，洗板要*（包括加樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的時(shí)候都必需充分混合均勻）。

5. 終止液為強(qiáng)酸性物質(zhì)，避免接觸皮膚。

6. 不要使用過了有效期的試劑盒，也不要混合使用不同批次的試劑盒，這樣會(huì)引起測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。

7. 試劑盒的儲(chǔ)存條件是2-8℃，切勿冷凍。

   　　二、剩余試劑的妥善保存：

   酶聯(lián)免疫試劑盒恢復(fù)至室溫后，取出要使用的酶標(biāo)板孔，未使用的酶標(biāo)板孔應(yīng)及時(shí)放回鋁箔袋，加入干燥劑，封緊封口，冷藏保存。

   試劑盒常用檢測(cè)方法簡(jiǎn)介

   ELISA試劑盒一般適合樣品檢測(cè)量大，實(shí)驗(yàn)室中常用于初篩的檢測(cè)方法。若檢測(cè)到陽性樣本，再用確認(rèn)方法做準(zhǔn)確定量。

   試劑盒檢測(cè)方法及優(yōu)點(diǎn)介紹：

   A、間接法：此測(cè)定方法與直接法類似，差別在于一級(jí)抗體沒有酶標(biāo)記，改用酶標(biāo)記的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來測(cè)定抗原量。

   優(yōu)勢(shì)：二抗可以加強(qiáng)信號(hào)，而且有多種選擇能做不同的測(cè)定分析，不加酶標(biāo)記的一級(jí)抗體則能保留它最多的免疫反應(yīng)性。

   B、直接法：將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標(biāo)記的一級(jí)抗體，即可測(cè)定抗原總量，此一級(jí)抗體的特異性非常重要。

   優(yōu)勢(shì)：操作手續(xù)簡(jiǎn)短，因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。

   C、雙抗體夾心法：被檢測(cè)的抗原包被在兩個(gè)抗體之間，其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體，另一個(gè)則是檢測(cè)抗體，此抗體可用酶標(biāo)記后直接測(cè)定抗原的量，或不標(biāo)記，再透過酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來測(cè)定抗原的量，這兩種抗體必須小心選取，才可避免交互反應(yīng)或競(jìng)爭(zhēng)相同的抗原結(jié)合部位。